Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Beschreiwung
Cat No: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix ass e multiplex quantitative PCR Kit baséiert op RNA als Schabloun.Am Experiment ginn ëmgedréint Transkriptioun a quantitativ PCR am selwechte Reaktiounsröhre gemaach, wat d'experimentell Operatioun vereinfacht an de Risiko vu Kontaminatioun reduzéiert.Den eenzegaartegen Design vu Puffer an Enzymmix kann an engem Schrëtt lyophiliséierte System benotzt ginn.De Kit benotzt Hëtztbeständeg Reverse Transkriptase fir effizient Synthese vun éischte Strang cDNA mat Hotstart Taq DNA Polymerase fir quantitativ Amplifikatioun.Et enthält optimiséiert Reaktiounsbuffer, Enzymemix asw., a Faktoren déi effektiv net-spezifesch PCR-Verstäerkung hemmen an d'Verstäerkungseffizienz vu multiple qPCR-Reaktiounen verbesseren, goufen bäigefüügt, wat multiple Fluoreszenz quantitativ Amplifikatioun erméiglecht, wärend d'Verstäerkungseffizienz vun de Primer assuréiert.
Komponenten
| Numm |
| 1. Lyo-Buffer |
| 2. Lyo-Enzym Mix |
| 3. Lyo protectant |
Transport Conditiounion
A: Lyo-Puffer a Protectant: -25 ~ -15 ℃, Haltbarkeet ass 1 Joer.
B: Lyo-Enzymmix, 2-8 ℃, Haltbarkeet ass 6 Méint.
Instruktioune fir Operatioun
1. Reaktiounssystem (Huelt 25μL als Beispill)
| Komponenten | Volumen (μL) | Finale Konzentratioun |
| Lyo-Buffer | 6 | 1* |
| Lyo-Enzym Mix | 1 | - |
| Lyo-Protectant | 8 | - |
| Primer Mix (10μM) | 1 | 0,1-1 uM |
| Probe Mix (10μM) | 0,5 | 0,05-0,5 uM |
| RNA Schabloun | 5 | - |
| DEPC H2O | Bis de 25 | - |
2. Optimiséiert Vëlo Protokoll
1) Standard Vëlo Protokoll
| Reaktioun Etapp | Temperatur | Zäit | Zyklus | |
| 1 | Reverse Transkriptioun | 50°Ca | 10 min | 1 |
| 2 | Éischt Denaturatioun | 95°C | 5 min | 1 |
| 3 | Amplifikatioun Reaktioun | 95°C | 15 sec | 45 Zyklen |
| 60°Cb | 30 secc |
2) Fast Cycling Protokoll
|
| Reaktioun Etapp | Temperatur | Zäit | Zyklus |
| 1 | Reverse Transkriptioun | 50°Ca | 2 min | 1 |
| 2 | Éischt Denaturatioun | 95°C | 2 sec | 1 |
| 3 | Amplifikatioun Reaktioun | 95°C | 1 sec |
45 Zyklen |
| 60°Cb | 13 secc |
Notiz:
a) Ëmgekéiert Transkriptioun: D'Temperatur kann 42°C oder 50°C fir 10-15 Minutten auswielen.
b) Amplifikatioun Reaktioun: D'Temperatur gëtt no dem Tm Wäert vun den entworfene Primer ugepasst.
c)Fluoreszenz Signal Acquisitioun: Setzt w.e.g. d'experimentell Prozedur no den Ufuerderunge vun derinstrument manuell.
Technesch Informatiounen / Spezifikatioune
| Hot Start | Built-in Hot Start |
| Detektiounsmethod | Primer-Sonde Detektioun |
| PCR Method | Ee Schrëtt RT-qPCR |
| Typ vun Echantillon | RNA |
Notizen
1. Dëst Produkt ass nëmme fir Fuerschung benotzt.
2. Gitt w.e.g. déi néideg PPE, sou Labo Mantel an Handschuesch, fir Är Gesondheet a Sécherheet ze garantéieren!
