CHO HCP ELISA Kit
Eng One-Step immunosorbent ELISA Method gëtt an dësem Assay benotzt.Echantillon mat CHOK1 HCP reagéieren gläichzäiteg mat HRP-markéiert Geess Anti-CHOK1 Antikörper an Anti-CHOK1 Antikörper op der ELISA Plack Beschichtete, schlussendlech e Sandwich Komplex vun fest-Phase Antikörper-HCP-label Antikörper bilden.Ongebonnen Antigen-Antikörper kann ewechgeholl ginn andeems Dir d'ELISA Plack wäscht.Den TMB-Substrat gëtt an d'Wuel bäigefüügt fir genuch Reaktioun.D'Faarwentwécklung gëtt gestoppt nodeems d'Stopléisung bäigefüügt gëtt, an den OD oder Absorptiounswäert vun der Reaktiounsléisung bei 450/650nm gëtt mat engem Mikroplate Lieser gelies.Den OD Wäert oder Absorptiounswäert ass proportional zum HCP Inhalt an der Léisung.Vun dësem kann d'HCP Konzentratioun an der Léisung no der Standardkurve berechent ginn.
Applikatioun
Dëse Kit gëtt benotzt fir den Inhalt vun CHOK1 Hostzellproteinreschter a Proben quantitativ z'entdecken.
CBestanddeeler
| S/N | Komponent | Konzentratioun | Stockage Konditiounen |
| 1 | CHOK1 HCP Standard | 0,5 mg/ml | ≤-20 ℃ |
| 2 | Anti-CHO HCP-HRP | 0,5 mg/ml | ≤-20 ℃, schützt vu Liicht |
| 3 | TMB | NA | 2-8 ℃, schützt vu Liicht |
| 4 | 20 × PBST 0,05% | NA | 2-8 ℃ |
| 5 | Stop Léisung | NA | RT |
| 6 | Microplate sealers | NA | RT |
| 7 | BSA | NA | 2-8 ℃ |
| 8 | Héich Adsorptioun Pre-Beschichtung Platen | NA | 2-8 ℃ |
Ausrüstung néideg
| Verbrauchsmaterial / Ausrüstung | Fabrikatioun | Katalog |
| Microplate Lieser | Molekulare Geräter | Spectra Max M5, M5e oder gläichwäerteg |
| Thermomixer | Eppendorf | Eppendorf/5355, oder gläichwäerteg |
| Vortex Mixer | IKA | MS3 Digital, oder gläichwäerteg |
Stockage a Stabilitéit
1.Transport bei -25~-15°C.
2.Stockage Konditiounen sinn wéi an Table 1 gewisen;Komponenten 1-2 gi gespäichert ≤–20°C, 5-6 gi gespäichert RT,3、4, 7, 8 sinn bei 2-8 ℃ gespäichert;d'Validitéit Period ass 12 Méint.
Produit Parameteren
1.Sensibilitéit: 1 ng/ml
2.Detektiounsberäich: 3-100ng/ml
3.Präzisioun: Intraassay CV≤ 10%, Interassay CV≤ 15%
4.HCP Ofdeckung: >80%
5.Spezifizitéit: Dëse Kit ass universell well et spezifesch mat CHOK1 HCP reagéiert onofhängeg vum Reinigungsprozess.
Reagenspräparatioun
1.PBST 0,05%
Huelt 15 ml 20 × PBST 0,05%, verdënntem an ddH2O, a bis zu 300 ml gemaach.
2.1,0% BSA
Huelt 1g BSA aus der Fläsch a verdënnt an 100 ml PBST 0,05%, mëscht gutt bis komplett opgeléist, a späichert bei 2-8°C.De preparéierten Verdünnungsbuffer ass valabel fir 7 Deeg.Et ass recommandéiert ze preparéieren wéi néideg.
3.Detektiounsléisung 2μg/ml
Huelt 48μL vun 0,5 mg / ml Anti-CHO HCP-HRP a verdënnt an 11,952μL vun 1% BSA fir eng final Konzentratioun vun 2μg / ml Detektiounsléisung ze kréien.
4.QC a Virbereedung vun CHOK1 HCP Standards
| Tube Nee. | Original | Konzentratioun | Volumen | 1% BSA | Gesamtvolumen | Finall |
| A | Standard | 0,5 mg/ml | 10 | 490 | 500 | 10.000 |
| B | A | 10.000 | 50 | 450 | 500 | 1.000 |
| S1 | B | 1.000 | 50 | 450 | 500 | 100 |
| S2 | S1 | 100 | 300 | 100 | 400 | 75 |
| S3 | S2 | 75 | 200 | 175 | 375 | 40 |
| S4 | S3 | 40 | 150 | 350 | 500 | 12 |
| S5 | S4 | 12 | 200 | 200 | 400 | 6 |
| S6 | S5 | 6 | 200 | 200 | 400 | 3 |
| NC | NA | NA | NA | 200 | 200 | 0 |
| QC | S1 | 100 | 50 | 200 | 250 | 20 |
Dësch: Virbereedung vun QC an Standarden
Assay Prozedur
1.Bereet d'Reagense wéi an der "Reagenspreparatioun" uewen uginn.
2.Huelt 50μL Standarden, Proben a QCs (kuckt Table 3) an all Brunn, füügt dann 100μL Detection Léisung (2μg/ml);Deckt Plack mat Sealer, a setzt d'ELISA Plack op den Thermomixer.Inkubéiert bei 500rpm, 25±3℃ fir 2 Stonnen.
3.Invertéiert d'Mikroplack am Spull an entlooss d'Beschichtungsléisung.Pipette 300μL PBST 0,05% an all Brunn fir d'ELISA Plack ze wäschen an d'Léisung ze läschen, a widderhuelen d'Wäsch 3 Mol.Invertéiert d'Plack op engem proppere Pabeierhandtuch a klappt dréchen.
4.Füügt 100μL TMB-Substrat (kuckt Table 1) an all Brunn, versiegelt d'ELISA-Plack, a inkubéiert am Däischteren bei 25±3 ℃ fir 15 min.
5.Pipette 100μL Stop Léisung an all Well.
6.Mooss d'Absorptioun bei der Wellelängt vun 450/650nm mat engem Mikroplate Lieser.
7.Analyséiert Daten duerch SoftMax oder gläichwäerteg Software.Plot Standardkurve mat engem véier-Parameter logistesche Regressiounsmodell.
Standard Curve Beispill
NOTÉIERT: Wann d'Konzentratioun vum HCP an der Probe déi iewescht Limit vun der Standardkurve iwwerschreift, muss et virum Test richteg mat Verdünnungsbuffer verdünnt ginn.
NOTIZEN
D'Stoppléisung ass 2M Schwefelsäure, behandelt w.e.g. virsiichteg fir Spritzen ze vermeiden!
