Ultra Nuclease GMP-Grad
Cat No: HC2016A
UltraNuclease GMP-Grad gëtt ausgedréckt a gereinegt an Escherichia coli (E.coli) duerch genetesch manipuléiert a preparéiert ënner de GMP Ëmfeld.Et kann d'Viskositéit vum Zellsupernatant an Zelllysat an der wëssenschaftlecher Fuerschung reduzéieren, d'Proteinreinigungseffizienz erhéijen an d'Protein funktionell Fuerschung verbesseren.D'Produkt kann och Host-Nukleinsäurereschter op pg-Grad reduzéieren, d'Performance an d'Sécherheet vu biologesche Produkter vun Uwendungen verbesseren, dorënner Virusreinigung, Impfstofffabrikatioun, a Protein / Polysaccharid pharmazeutesch Fabrikatioun.Donieft kann d'Produkt och applizéiert ginn fir d'Klumpung vu mënschleche periphere Bluttmononuklear Zellen (PBMC) an der Zelltherapie an der Impfungentwécklung ze vermeiden.
UltraNuclease gëtt a Form vun engem steriliséierte Reagens geliwwert, eluéiert a Puffer (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% Glycerin), mat der Erscheinung vun enger faarweger, transparenter Flëssegkeet.Dëst Produkt gëtt duerch GMP Prozess Ufuerderunge produzéiert an a flësseger Form geliwwert.
Komponenten
UltraNuclease GMP-Grad (250 U/μL)
Stockage Konditiounen
D'Produkt gëtt mat trockenem Äis verschéckt a ka bei -25℃ ~ -15°C fir zwee Joer gelagert ginn.
Wann de Produit opgemaach ass a bei 4 ℃ fir méi wéi eng Woch gelagert ass, empfeelen mir Iech ze filterend'Produkt fir mikrobiell Kontaminatioun ze vermeiden.
Spezifikatioune
| Expression Host | Rekombinant E. coli mat UltraNuclease Gen |
| Molekulare Gewiicht | 26,5 kDa |
| soelektresche Punkt | 6,85 |
| Rengheet | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Stockage Buffer | 20 mM Tris-HCL pH 8.0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% Glycerin |
|
Eenheet Definitioun | D'Definitioun vun enger Aktivitéit Eenheet (U) ass d'Quantitéit un Enzym benotztänneren den Absorptiounswäert vun ΔA260 ëm 1,0 an 30 Minutten an engem 2,625 mlReaktiounssystem bei 37 ℃ mat engem pH vun 8,0 (entsprécht komplett Verdauung vun37 μg Lachs Spermien DNA an Oligonukleotiden). |
Uweisungen
1. Prouf Kollektioun
Adherent Zellen: Huelt de Medium ewech, wäscht d'Zellen mat PBS, a läscht de Supernatant.
Suspensiounszellen: sammelen d'Zellen duerch Zentrifugéierung, wäschen d'Zellen mat PBS, centrifugéieren op 6.000rpm fir 10 min, sammelen de Pellet.
Escherichia coli: sammelt d'Bakterien duerch Zentrifugéierung, wäscht eemol mat PBS, centrifugéiert bei 8.000rpm fir 5 min, a sammelen de Pellet.
2. Prouf Behandlung
Behandelt déi gesammelten Zellpellets mat Lysisbuffer am Verhältnis vu Mass (g) zum Volume (ml) 1: (10-20), oder duerch mechanesch oder chemesch Methoden op Äis oder bei Raumtemperatur (1g Zellpellet enthält ongeféier
109 Zellen).
3. Enzym Behandlung
Füügt 1-5mM MgCl an de Reaktiounssystem an ajustéiert de pH op 8-9.
Füügt UltraNuclease no dem Verhältnis vun 250 Eenheeten fir 1 g Zellpellets ze verdauen, inkubéiert bei 37 ℃ fir méi wéi 30 Minutten.Gitt w.e.g. op de "Recommandéiert Reaktiounszäit" Formulaire fir ze wielenDauer vun der Behandlung.
4. Supernatant Kollektioun
Zentrifuge bei 12.000 U/min fir 30 Minutten a sammelt de Supernatant.
Bemierkung: Wann d'Léisung sauer oder alkalesch ass, oder héich Konzentratioune vu Salz, Botzmëttelen oderDenaturanten, erhéicht w.e.g. d'Enzymdoséierung oder verlängert d'Behandlungszäit deementspriechend.
Recommandéiert Reaktioun Conditions
| Parameter | Optimalen Zoustand | Effektive Conditioun |
| Mg²+Konzentratioun | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Temperatur | 37 ℃ | 0-42 ℃ |
| DTT Konzentratioun | 0-100 mM | >0 mM |
| Mercaptoethanol Konzentratioun | 0-100 mM | >0 mM |
| Monovalent Kation Konzentratioun | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Phosphat lon Konzentratioun | 0-10 mM | 0-100 mM |
Recommandéiert Reaktioun Zäit (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| UltraNuclease Betrag (Finale Konzentratioun) | Reaktioun Zäit |
| 0,25 U/ml | >10h |
| 2,5 U/ml | > 4h |
| 25 U/ml | 30 min |
Notizen:
Gitt w.e.g. déi néideg PPE, sou Labo Mantel an Handschuesch, fir Är Gesondheet a Sécherheet ze garantéieren!
