RNAse Inhibitor (Glycerol fräi)
Murine RNase Inhibitor ass e rekombinante murine RNase Inhibitor ausgedréckt a gereinegt aus E.coli.Et bindt sech un RNase A, B oder C an engem 1: 1 Verhältnis duerch net-kovalent Bindung, doduerch d'Aktivitéit vun den dräi Enzymen hemmt an d'RNA virun der Degradatioun schützt.Wéi och ëmmer, Et ass net effektiv géint RNase 1, RNase T1, S1 Nuclease, RNase H oder RNase vun Aspergillus.Murine RNase inhibitor war vun RT-Hinnen alleguer getest, RT-qPCR an IVT mRNA, a war kompatibel mat verschiddene kommerziell ëmgedréint transcriptases, DNA polymerases an RNA polymerases.
Am Verglach mat mënschlechen RNase Inhibitoren enthält murine RNase Inhibitor keng zwee Cysteine déi héich empfindlech op Oxidatioun sinn, wat d'Inaktivéierung vum Inhibitor verursaacht.Dat mécht et stabil bei niddrege Konzentratioune vun DTT (manner wéi 1 mM).Dës Fonktioun mécht et gëeegent fir Reaktiounen ze benotzen wou héich Konzentratioune vun DTT der Reaktioun negativ ass (zB Echtzäit RT-PCR).
AApplikatioun
Dëst Produkt ka wäit an all Experiment benotzt ginn wou RNase Interferenz méiglech ass fir RNA Degradatioun ze vermeiden, sou wéi:
1.First-strand cDNA Synthese, RT-PCR, RT-qPCR, etc .;
2.Protect RNA vun der Degradatioun an der In-vitro Transkriptioun / Iwwersetzung (zB viral Replikatioun in vitro);
3.Inhibitioun vun der RNase Aktivitéit während der RNA Isolatioun a Reinigung.
Stockage Konditiounen
Store bei -25 ~ -15 ℃;
Afréiere-Thaw Zyklen ≤ 5 Mol;
Valabel fir 1 Joer.
Eenheet Definitioun
Eng Eenheet ass definéiert wéi d'Quantitéit vum RNase Inhibitor néideg fir d'Aktivitéit vu 5 ng vun RNase A ëm 50% ze hemmen.
Molekulare Gewiicht
RNase Inhibitor (Glycerol-gratis) ass e 50 kDa Protein.
Qualitéitskontroll
Exonuklease Aktivitéit:
D'Inkubatioun vu 40 U Enzym mat 1 μg λ-Hind III verdauen DNA fir 16 Stonnen bei 37 ° C huet zu keng detektéierbaren Degradatioun vun der DNA gefouert wéi duerch Gelelektrophorese bestëmmt.
Endonuklease Aktivitéit:
D'Inkubatioun vu 40 U Enzym mat 1 μg λ DNA fir 16 Stonnen bei 37 ° C huet zu keng detektéierbaren Degradatioun vun der DNA gefouert wéi duerch Gelelektrophorese bestëmmt.
Nicking Aktivitéit:
Inkubatioun vu 40 U Enzym mat 1 μg pBR322 fir 16 Stonnen bei 37 ℃ huet zu keng detektéierbaren Degradatioun vun der DNA gefouert wéi duerch Gelelektrophorese bestëmmt.
RNase Aktivitéit:
Inkubatioun vu 40 U Enzym mat 1,6 μg MS2 RNA fir 4 Stonnen bei 37 ℃ huet zu keng detektéierbaren Degradatioun vun der RNA gefouert wéi duerch Gelelektrophorese bestëmmt.
E.coli DNA:
40 U Enzym gëtt vum TaqMan qPCR festgestallt.D'E.coli DNA ass ≤ 0. 1pg/40U.
Notts
1.Don't Shake oder réieren gewaltsam fir Enzym Inaktivéierung ze verhënneren.
2.RNase Inhibitor ass aktiv bei Temperaturen vun 25 ℃ bis 55 ℃ an ass bei ≥ 65 ℃ inaktivéiert.
3.D'Aktivitéit vun RNase H, RNase 1, an RNase T1 gëtt net hemmt.
4.De pH-Gamme fir d'Inhibitioun vun der RNase Aktivitéit ass breet (aktiv bei pH 5-9), déi maximal Aktivitéit bei pH 7-8 weist.
