2 × PCR Master Mix (ouni Faarf)
PCR Master Mix ass eng Aart vun konventionell PCR premixed Léisung déi prett ass ze benotzen, dorënner Taq DNA Polymerase, dNTP Mix MgCl2 an optimiséiert Puffer.Wärend der Reaktioun kann nëmmen de Primer an d'Schabloun fir d'Verstäerkung bäigefüügt ginn, wat d'Operatiounsschrëtt vum Experiment immens vereinfacht.Dëst Produkt enthält exzellent Stabilisatoren a ka fir 3 Méint bei 4 ℃ gelagert ginn.D'PCR-Produkt huet 3'-dA-Protrusioun a kann einfach an T-Vektor gekloont ginn.
Stockage Konditiounen
De Produit soll bei -25 ℃ ~ -15 ℃ fir zwee Joer gespäichert ginn.
Spezifikatioune
| Fidelity (vs. Taq) | 1× |
| Hot Start | No |
| Iwwerhang | 3'-A |
| Polymerase | Taq DNA Polymerase |
| Reaktioun Format | SuperMix oder Master Mix |
| Reaktioun Vitesse | Standard |
| Produit Typ | PCR Master Mix (2×) |
Uweisungen
1.Reaktioun System
| Komponenten | Gréisst (μL) |
| Schabloun DNA | Gëeegent |
| Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
| PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | Zu 50 |
2.Amplifikatioun Protokoll
| Zyklus Schrëtt | Temperatur (°C) | Zäit | Cyclen |
| Pre-Denaturatioun | 94 ℃ | 5 min | 1 |
| Denaturatioun | 94 ℃ | 30 sec | 35 |
| Annealing | 50-60 ℃ | 30 sec | |
| Erweiderung | 72 ℃ | 30-60 Sek./Kb | |
| Finale Extensioun | 72 ℃ | 10 Minutten | 1 |
Notizen:
1) Schabloun Benotzung: 50-200 ng genomesch DNA;0,1-10 ng Plasmid DNA.
2) Mg2+Konzentratioun: Dëst Produkt enthält 3 mM MgCl2 gëeegent fir déi meescht PCR Reaktiounen.
3) Annealing Temperatur: Kuckt w.e.g. op den theoreteschen Tm Wäert vun Primers.D'annealing Temperatur kann op 2-5 ℃ manner wéi den theoretesch Wäert vun der primer gesat ginn.
4) Verlängerung Zäit: Fir molekulare Identifikatioun, 30 sec / kb recommandéiert.Fir Genklonen, 60sec / kb ass recommandéiert.
Notizen
1.Fir Är Sécherheet a Gesondheet, gitt w.e.g. Labo-Mäntel an Wegwerfhandschuesch fir Operatioun.
2.Nëmme fir Fuerschung benotzt!
