2 × PCR Super Mix (mat Dye)
2 × PCR Master Mix enthält Taq DNA Polymerase, dNTPs, an aner PCR-erfuerderlech Komponenten.De Master Mix ass stabil fir 3 Méint bei 4 ℃ mat eise personaliséierte Stabilisatoren.D'Pre-Mix Léisung ass fir konventionell PCR optimiséiert a prett fir ze benotzen andeems d'DNA Template a Primer bäigefüügt ginn.D'PCR-Produkter kënnen direkt fir Elektrophorese mat virgelueden Bromophenol bloe Faarf geluede ginn.Déi amplifizéiert Produkter enthalen 3'-dA-Protrusioun a kënne ganz einfach an T-Vektor gekloont ginn.Den 2 × PCR Master Mix vereinfacht PCR Prozedur a reduzéiert Kontaminatioun.
Stockage Konditiounen
Produkter solle bei -25 ℃ ~ -15 ℃ fir 2 Joer gelagert ginn.
Spezifikatioune
Fidelity (vs. Taq) | 1× |
Hot Start | No |
Iwwerhang | 3'-A |
Polymerase | Taq DNA Polymerase |
Reaktioun Format | SuperMix oder Master Mix |
Reaktioun Vitesse | Standard |
Produit Typ | PCR Master Mix (2x) |
Uweisungen
1.Reaktioun System
Komponenten | Volumen(μL) |
Schabloun DNA | Gëeegent |
Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
2 × PCR Master Mix | 25 |
ddH2O | zu 50 |
2.Amplifikatioun Protokoll
Zyklus Schrëtt | Temperatur (°C) | Zäit | Cyclen |
Éischt Denaturatioun | 94 | 5 min | 1 |
Denaturatioun | 94 | 30 sec | 35 |
Annealing | 50-60 | 30 sec | |
Erweiderung | 72 | 30-60 Sek./Kb | |
Finale Verlängerung | 72 | 10 min | 1 |
Notiz:
1) Schabloun Benotzung: 50-200ng genomesch DNA;0,1-10ng Plasmid DNA.
2) Mg2+Konzentratioun: Dëst Produkt enthält 3mM MgCl2, gëeegent fir déi meescht PCR Reaktiounen.
3) Annealing Temperatur: Kuckt w.e.g. op den theoreteschen Tm Wäert vun Primer.D'annealing Temperatur kann op 2-5 ℃ manner wéi den theoreteschen Wäert vun der primer gesat ginn.
4) Verlängerungszäit: Fir molekulare Identifikatioun gëtt 30 sec / kb recommandéiert.Fir Gen-Klonen gëtt 60 sec/kb recommandéiert.
Notizen
1.PCR Produkter mat 2 × PCR Master Mix sinn net gëeegent fir Polyacrylamid Gel Elektrophorese.
2.Fir Är Sécherheet a Gesondheet, gitt w.e.g. Labo-Mäntel an Wegwerfhandschuesch fir Operatioun.
3.Et gëtt NËMMEN fir Fuerschung benotzt!