DNase I (Rnase Free) (2u/ul)
Katalognummer: HC4007B
DNase I ass eng Endonuklease déi eenzel oder duebelstrengeg DNA verdaut kann.Et kann Phosphodiesterbindungen hydrolyséieren fir Mono- an Oligodeoxynukleotiden ze produzéieren déi eng 5'-Phosphatgrupp an eng 3'-OH Grupp enthalen.Den optimale pH-Bereich vun DNase I ass 7-8.D'Aktivitéit vun DNase I hänkt vun Ca2+a kann duerch divalent Metallionen wéi CO2 aktivéiert ginn2, Mn2+, Zn2+, etc. An der Presenz vum Mg2+, DNase kann ech zoufälleg all Site vun duebel-strenged DNA spalten;Wärend a Präsenz vum Mn2+, DNase I kann DNA duebelstrengeg op der selwechter Plaz spalten, stompeg Enden oder plakeg Enden bilden mat 1-2 Nukleotiden déi ausstinn.Et kann fir d'Veraarbechtung vu verschiddene RNA Proben benotzt ginn.
Komponenten
| Numm | 1 KU | 5 KU |
| Rekombinant DNaseI (RNase-gratis) | 500 l | 5 × 500 μL |
| DNase I Reaktiounsbuffer (10×) | 1 mll | 5 × 1 ml |
Stockage Konditiounen
Dëst Produkt soll bei -25 ~ -15 ℃ fir 2 Joer gelagert ginn.Vermeit w.e.g. widderholl Afréiere-Thaw.
Uweisungen
Applizéiert fir d'Entfernung vun DNA aus RNA Echantillon nëmmen fir Referenz.
1. Benotzt w.e.g. RNase-gratis Zentrifuge Réier a Pipette Tipps fir de folgende Reaktiounssystem ze preparéieren:
| Komponenten | Volumen (μL) |
| DNase I Reaktiounsbuffer (10×) | 1 |
| Rekombinant DNasel (RNase-gratis) | 1 |
| RNA | X |
| RNase-gratis ddH2O | Bis 10 |
2. D'Reaktiounsbedéngungen sinn wéi follegt: 37 ℃, no 15-30 Minutten, addéiere eng final Konzentratioun vun 2,5 mM EDTA Léisung a mëschen gutt, dann 65 ℃ fir 10 Minutten.Déi veraarbechte Schabloun ka fir spéider RT-PCR oder RT-qPCR Experimenter benotzt ginn, etc.
Notizen
1. DNase l ass sensibel fir kierperlech Denaturatioun;Beim Vermëschung, sanft d'Reagenzglieser ëmgedréint angutt schüttelen, net kräfteg schüttelen.
2. Den Enzym soll an enger Äisbox oder op engem Äisbad gespäichert ginn wann se benotzt ginn, a soll direkt nom Gebrauch bei -20 ℃ gespäichert ginn.
3. Dëst Produkt ass nëmme fir Fuerschung benotzt.
4. Bedreiwen w.e.g. mat Labo-Mäntel an Wegwerfhandschuesch, fir Är Sécherheet.
