Viral DNA / RNA Extraktioun Kit
Dëse Kit ass gëeegent fir déi séier Extraktioun vun héich-Rengheet viral DNA / RNA aus Echantillon wéi nasopharyngeal Swabs, Ëmwelt- Swabs, Zell Kultur supernatants, an Tissu homogenate supernatants.De Kit baséiert op Silica Membran Reinigungstechnologie, déi d'Bedierfnes eliminéiert fir Phenol / Chloroform organesch Léisungsmëttel ze benotzen oder Zäitopwendeg Alkohol Nidderschlag fir viral DNA / RNA vu héich Qualitéit ze extrahieren.D'Nukleinsäuren, déi kritt goufen, si fräi vu Gëftstoffer a prett fir an Downstream Experimenter ze benotzen wéi ëmgedréint Transkriptioun, PCR, RT-PCR, Echtzäit PCR, Next-Generation Sequencing (NGS), an Northern Blot.
Stockage Konditiounen
Store bei 15 ~ 25 ℃, a transportéiert bei Raumtemperatur
Komponenten
| Komponenten | 100 RXNS |
| Buffer VL | 50 ml |
| Buffer RW | 120 ml |
| RNase-fräi ddH2 O | 6ml vun |
| FastPure RNA Kolonnen | 100 |
| Sammlung Tubes (2ml) | 100 |
| RNase-free Collection Tubes (1,5 ml) | 100 |
Buffer VL:Bitt en Ëmfeld fir Lysis a Bindung.
Buffer RW:Ewechzehuelen Rescht Proteinen an aner Gëftstoffer.
RNase-gratis ddH2O:Elute DNA / RNA vun der Membran an der Spin Kolonn.
FastPure RNA Kolonnen:Spezifesch adsorbéieren DNA / RNA.
Sammlung Tubes 2 ml:Filtrat sammelen.
RNase-free Collection Tubes 1,5 ml:Sammelt DNA / RNA.
Uwendungen
Nasopharyngeal Swabs, Ëmweltswabs, Zellkultur Supernatanten, an Tissue homogeniséiert Supernatanten.
Selwer virbereet Materials
RNase-gratis Pipette Tipps, 1,5 ml RNase-gratis Zentrifuge Réier, Zentrifuge, Wirbelmixer a Pipetten.
Experimenter Prozess
Maacht all déi folgend Schrëtt an engem Biosécherheetskabinett.
1. Füügt 200 μl vun der Probe an e RNase-fräien Zentrifuge Röhre (mat PBS oder 0,9% NaCl am Fall vun net genuch Probe ausmaachen), 500 μl Buffer VL addéieren, gutt mëschen andeems Dir 15 - 30 Sekonnen vortexéiert, an centrifugéiert. kuerz fir d'Mëschung um Enn vum Röhre ze sammelen.
2. Place FastPure RNA Kolonnen an enger Sammlung Tubes 2 ml.Transfert d'Mëschung vum Schrëtt 1 op FastPure RNA Columns, centrifugéiert bei 12.000 RPM (13.400 × g) fir 1 min, a verwinnt de Filtrat.
3. Füügt 600 μl Buffer RW op FastPure RNA Columns, centrifuge bei 12.000 RPM (13.400 × g) fir 30 Sekonnen, a verwerfen de Filtrat.
4. Widderhuelen Schrëtt 3.
5. Zentrifuge déi eidel Kolonn bei 12.000 RPM (13.400 × g) fir 2 min.
6. Virsiichteg Transfer FastPure RNA Columns an eng nei RNase-gratis Collection Tubes 1,5 ml (am Kit geliwwert), a füügt 30 - 50 μl RNase-gratis ddH2O an d'Mëtt vun der Membran ouni d'Kolonn ze beréieren.Loosst 1 min bei Raumtemperatur stoen an centrifuge bei 12.000 rpm (13.400 × g) fir 1 min.
7. FastPure RNA Kolonnen ewechhuelen.D'DNA / RNA kann direkt fir spéider Assays benotzt ginn, oder bei -30 ~ -15 ° C fir eng kuerz Period oder -85 ~ -65 ° C fir eng méi laang Zäit gelagert ginn.
Notizen
Nëmme fir Fuerschung benotzt.Net fir Diagnostice Prozeduren ze benotzen.
1. Equilibréiert Proben op Raumtemperatur am Viraus.
2. Viren sinn héich ustiechend.Gitt sécher datt all néideg Sécherheetsmoossnamen virum Experiment geholl ginn.
3. Vermeiden widderholl Afréiere an thawing vun der Prouf, well dëst zu Degradatioun oder reduzéiert Ausbezuelen vun der extrahéiert viral DNA / RNA féieren kann.
4. Self-preparéiert Ausrüstung enthält RNase-gratis Pipette Tipps, 1,5 ml RNase-gratis Zentrifuge Réier, Zentrifuge, Wirbelmixer a Pipetten.
5. Wann Dir de Kit benotzt, gitt e Labo Mantel, Wegwerf Latex Handschuesch an eng Wegwerf Mask a benotzt RNase-gratis Verbrauchsmaterial fir de Risiko vun der RNase Kontaminatioun ze minimiséieren.
6. Maacht all Schrëtt bei Raumtemperatur, wann net anescht uginn.
Mechanismus & Workflow
